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Chimie · Licence 3 · 2 min de lecture

Séparation chromatographique et résolution

Grandeurs d'un chromatogramme de chromatographie en phase gazeuse ou liquide haute performance : temps de rétention, temps mort, facteur de rétention, facteur de sélectivité entre deux solutés voisins. Efficacité de la colonne mesurée par le nombre de plateaux théoriques et la hauteur équivalente à un plateau théorique, obtenus à partir de la largeur d'un pic. Résolution entre deux pics et critère de séparation à la ligne de base. Leviers d'amélioration d'une séparation : longueur et granulométrie de la colonne, débit et nature de la phase mobile, température, gradient d'élution. Couplage avec un détecteur et quantification par étalonnage externe ou interne.

Chapitre du programme : Chimie analytique instrumentale

Bloc 1 sur 7 · Comprendre

Comprendre

La chromatographie sépare des espèces par leur distribution et leurs interactions entre une phase mobile et une phase stationnaire. Le temps de rétention situe un pic sur le chromatogramme ; sa largeur reflète l'étalement. Deux temps différents ne garantissent pas une séparation exploitable si les pics sont très larges.

Bloc 2 sur 7 · Approfondir

Approfondir

Avec des largeurs à la base w1,w2w_1,w_2 et des temps tR,1<tR,2t_{R,1}<t_{R,2} exprimés dans la même unité, la résolution est Rs=2(tR,2−tR,1)/(w1+w2)R_s=2(t_{R,2}-t_{R,1})/(w_1+w_2). La convention de largeur est essentielle : une formule utilisant les largeurs à mi-hauteur possède un facteur différent. La résolution ne remplace pas à elle seule une étude de quantification ou de pureté.

Bloc 3 sur 7 · Exemple

Exemple travaillé

Deux pics ont des temps de 5 et 6 minutes, et chacun une largeur à la base de 0,500{,}50 minute. La résolution vaut 2(6−5)/(0,50+0,50)=22(6-5)/(0{,}50+0{,}50)=2. Si les largeurs doublent sans changer les centres, elle tombe à 1. Les mêmes temps de rétention peuvent donc correspondre à des séparations très différentes. Une valeur proche de 1,5 est un repère usuel de séparation à la ligne de base pour des pics idéalisés, pas une garantie universelle de qualité analytique.

Bloc 4 sur 7 · Visualiser

Visualiser le raisonnement

Le tableau oppose distance des centres et étalement. Le rapport est sans dimension parce que temps et largeurs sont dans la même unité. Pour améliorer la séparation, on peut agir sur sélectivité et efficacité, avec des contraintes de durée et de conditions expérimentales.

Séparation chromatographique et résolution — Centres : 5 min et 6 min. Largeurs à la base : 0,50 min chacune. Résolution=2 ; largeurs doublées : 1. Tableau exact des étapes ou résultats de l'exemple travaillé ; aucune image d'ambiance.
Séparation chromatographique et résolution · Ouvrir la figure en grand

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Sources

  • IUPAC Gold Book, peak resolution : https://old.goldbook.iupac.org/pdf/P04465.pdf
  • IUPAC, largeurs des pics : https://goldbook.iupac.org/terms/view/P04466

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