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Biologie · Licence 3 · 1 leçon

Fiche de révision : Biotechnologies et génie génétique

L’essentiel de chaque leçon du chapitre, tel qu’il est écrit dans le cours : à relire, à imprimer, puis à vérifier par l’entraînement.

Les notions de cette fiche

  • Édition ciblée du génome par CRISPR-Cas9 — Comprendre l'outil, ses conditions d'emploi et ses limites, sur les faits établis. Origine : un mécanisme d'immunité adaptative procaryote, détourné en outil de laboratoire. Reconnaissance de la cible : un ARN guide apparie une vingtaine de nucléotides de la séquence visée, mais la nucléase ne coupe QUE si un motif court adjacent — le motif PAM — est présent sur l'ADN ; sans lui, pas de clivage, quel que soit l'appariement. Le clivage produit une cassure double brin, et c'est la RÉPARATION qui décide du résultat : la jonction d'extrémités non homologues laisse de petites insertions ou délétions, donc invalide le gène ; la recombinaison homologue, en présence d'une matrice fournie, permet un remplacement dirigé, mais elle est bien plus rare et dépend de la phase du cycle cellulaire. Ce que la méthode ne garantit pas : la spécificité — des coupures hors cible existent, se prédisent mal et se MESURENT ; et l'homogénéité — sans clonage, une population éditée est mosaïque. Distinction structurante, technique avant d'être réglementaire : une modification somatique ne concerne que l'individu traité, une modification germinale se transmet à sa descendance.

À maîtriser avant de commencer

Ces notions sont utilisées ici. Relisez-les si l’une d’elles vous échappe.

  • Structure de l'ADN — Double hélice, nucléotides (A, T, C, G), complémentarité des bases, séquence porteuse de l'information, universalité de l'ADN.
  • Réplication de l'ADN — Réplication semi-conservative (expérience de Meselson et Stahl), ADN polymérase, fidélité et erreurs, place dans le cycle cellulaire.
  • Mutations — Substitution, insertion, délétion ; mutations silencieuses, faux-sens, non-sens, décalage du cadre de lecture ; agents mutagènes ; mutations somatiques et germinales.
  • Expression génétique : transcription et traduction — Du gène à la protéine : transcription en ARN messager, code génétique (codons, redondance, universalité), traduction par le ribosome, relation génotype-phénotype.

Le début de la fiche

Extrait de la leçon « CRISPR-Cas9 : ciblage, réparation et contrôle », tel qu’il figure sur la fiche.

Retenir les relations

  • fobserveˊe=Nclones concerneˊsNclones analyseˊsf_{\text{observée}}=\frac{N_{\text{clones concernés}}}{N_{\text{clones analysés}}}

Annoncez cible, PAM, modification recherchée et méthode de validation. Une interprétation fonctionnelle peut demander des mesures d'ARN, de protéine ou de phénotype en plus du génotype. Cette leçon décrit des principes et des résultats de contrôle, sans protocole expérimental opératoire.

Les pièges à éviter et la version imprimable sont réservés à votre compte.

S’entraîner sur ces notions

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